探針法熒光定量PCR試劑盒試驗結(jié)果如何計算

更新時間：2024-03-12

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本試劑盒用于測定血清、血漿及相關(guān)液體的樣本中指標含量。

芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒性能：

1.準確性：標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

2.靈敏度：檢測濃度小于1.0U/L。

3.特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5.貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

6.有效期：6個月。

實驗原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定指標水平。用純化的指標抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入相關(guān)指標，再與HRP標記的指標抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣品中指標濃度。

計算：

以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

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